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使用蘇木素-伊紅染色液注意什么

文章出處:本站 人氣:4624 發(fā)表時(shí)間:2019-06-24 15:14:50

蘇木素-伊紅染色(hematoxylin and eosin,HE),種比較簡(jiǎn)便、可靠的快速切片染色法,以保證不拖延診斷時(shí)間,也是組織學(xué)技術(shù)的常規(guī)染色方法,而且,為了縮短某些程度的染色時(shí)間,通??捎眉訜岬姆椒▉?lái)實(shí)現(xiàn)。般是將切片或涂片浸在染色液內(nèi),連同染色皿置于37℃或56℃溫箱內(nèi)至所需時(shí)間。那么,使用蘇木素-伊紅染色液注意什么?

1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則無(wú)論進(jìn)行那種染色都會(huì)發(fā)生困難。脫蠟時(shí)間要充分,若溶蠟劑使用過(guò)久應(yīng)及時(shí)更換以免效率降低,若室溫過(guò)低,可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。

2.蘇木素染液使用段時(shí)間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過(guò)氧化物,必須過(guò)濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液般染過(guò)三、四百?gòu)埱衅螅?huì)減弱,著色不鮮艷,呈灰藍(lán)色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換新液。

3.染色的時(shí)間長(zhǎng)短需依據(jù):染劑對(duì)組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié)。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間。

4.分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過(guò)淡,過(guò)深等現(xiàn)象,因此分化后定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然旦復(fù)染后,組織會(huì)呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象。

5.還原液不宜過(guò)濃,若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜。

6.伊紅宜淡染,復(fù)染過(guò)深胞核會(huì)不清晰,影響鏡檢。

7.若脫水,透明等步驟不夠徹底,則組織表面會(huì)有層霧狀膜。若有這現(xiàn)象,應(yīng)立即更換純酒精脫水,再次透明。在潮濕的季節(jié)里應(yīng)注意酒精的濃度、若降低要及時(shí)更換。

8.染色后的組織切片、要將組織四周的污染物痕跡擦掉,以免影響美觀。

9.封固劑要適量,滴加時(shí)應(yīng)小心傾滴,蓋玻片要輕輕放置,以免氣泡產(chǎn)生影響鏡檢。蓋玻片大小選擇要合適,般要大于組織塊,以防封蓋不全,蓋玻片要放正,標(biāo)簽貼牢,編號(hào)清楚。從而保證切片的封藏和美觀。

10.染好的切片應(yīng)妥為保存,更應(yīng)避免日光照射,否則切片容易褪色。

高質(zhì)量的HE染色切片不僅僅是染色。它包括許多方面。先,應(yīng)注意“固定”環(huán)節(jié)。其次,應(yīng)注意脫水、透明、浸蠟、包埋和切片等步驟,張因固定、脫水等步驟有所缺陷的切片,染色是不可能鮮艷、透明、層次分明的。

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