巴氏染色液的染色注意事項
巴氏染色液的染色注意事項
細(xì)胞核著色不佳
(1)細(xì)胞核著色過淺:
1)鹽酸分化時間過長或蘇木素染液時間過長。需要縮短分化時間或延長堿化時間;每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配制蘇木素液。
2)在固定之前制片干燥。所以對巴氏染色的制片需要嚴(yán)格遵守濕固定的原則。
3)自來水的PH值偏酸性。使用堿性溶液。
(2)細(xì)胞核著色過深:
1)鹽酸溶液濃度不夠。適當(dāng)加入幾滴鹽酸以增加濃度。
2)制片用高于95%以上濃度的酒精固定后可以出現(xiàn)染色過深。應(yīng)用95%酒精固定。
細(xì)胞漿著色不佳
(1)如果全片內(nèi)胞漿都淡染,則需要延長染色時間或更換新液。
(2)如果胞漿不分色,均為淺紅色。制片在固定前干燥或制片被有大量球菌樣細(xì)菌影響胞漿染色。此情況可以適當(dāng)增加染色時間能夠部分糾正不分色狀況。
(3)胞漿染成灰色或紫色,是由于蘇木素染色時間過長或鹽酸分化不佳。經(jīng)過褪色后重新蘇木素可以糾正。
(4)由于標(biāo)本的不同,同樣配方的EA染液可造成偏藍(lán)、偏綠和偏紅,對不同的標(biāo)本應(yīng)該使用不同的EA染液。一般認(rèn)為,EA36和EA50用于婦科標(biāo)本,而EA65或改良EA用于非婦科標(biāo)本。
(5)胞漿不分色的另一重要原因是由于EA染液的PH值不恰當(dāng)所致。如染色為紅色,可以加少許磷鎢酸溶液糾正;如染色均為藍(lán)色或綠色,可以加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。對于改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳;染液使用更持久。