如何調整巴氏染色液使細胞胞漿呈藍色
巴氏染色法是脫落細胞染色中最 好的染色方法。蘇木素染液，細胞核內的染色質主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結構中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。 分化：蘇木素染色之后，用水洗去未結合在細胞上的染液，但是在細胞核中結合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細胞核和細胞漿染色的分明，把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結構，使色素與組織解離，分化不可過度。藍化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài)，而呈藍色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色，稱藍化作用，一般多用自來水浸洗即可變藍，也可用溫水（50度溫水最 佳）變藍。EA50染液的酸堿度對于巴氏染色的成功起著關鍵作用，EA50染液由伊紅、亮綠、等染料配成。伊紅、亮綠、橘黃等屬于酸性染料，在溶解媒中其發(fā)色團是負離子部分，發(fā)色團可與蛋白質中帶正電的氨基結合，從而是胞漿顯藍色、綠色、橘黃色或紅色，但蛋白質所帶正負電荷的多少是隨溶液的PH值而改變的，在偏堿環(huán)境中，蛋白質的羧基游離增多（帶負電），在偏酸環(huán)境中蛋白質氨基游離增多（帶正電），磷鎢酸在染色過程中，不但作為媒染劑可增加染料的著色力，同時磷鎢酸與碳酸鋰還是一對弱酸弱堿，實際上是一對緩沖劑，可中和分化及藍化時可能留下的少量酸或堿，保證染色達到理想效果，其適用于上皮細胞及間皮組織的標本，是陰道脫落細胞檢查中最常用的染色方法，該染色法不但具有顯示細胞核結構清晰、分色明顯、透明度好、胞漿受色鮮艷等特點。
巴氏染色法將胞核染為深藍色；鱗狀上皮底層、中層及表層角化前細胞胞質染綠色，表層不全角化細胞胞質染粉紅色，完全角化細胞胞質呈桔黃色；細菌：灰色；滴蟲：淡藍灰色；黏液：淡藍色或粉紅色；中性粒細胞和淋巴細胞、吞噬細胞胞質均為藍色；紅細胞染粉紅色；高分化鱗癌細胞可染成粉紅色或桔黃色；腺癌胞質呈灰藍色。
