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革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)流程:

1、 取載玻片用紗布擦干，載玻片的面用marker筆畫個(gè)小圈（用來(lái)大致確定菌液滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤下，除去油脂。

2、 涂片：

液體培養(yǎng)基：左手持菌液試管，在酒精燈火焰附近5cm左右打開管蓋；右手持接種環(huán)在火焰中燒灼滅菌，等冷卻后從試管中沾取菌液環(huán)，在潔凈無(wú)脂的載玻片上涂直徑2mm左右的涂膜，后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

固體培養(yǎng)基：先在載玻片上滴滴無(wú)菌水，再用接種環(huán)取少量菌體，涂在載玻片上，使其薄而均勻。

3、 晾干：讓涂片在空氣中自然干燥。

4、 固定：讓菌膜朝上，通過火焰2-3次固定（以不燙手為宜）。

5、 染色：將固定過的涂片放報(bào)紙上，滴加草酸銨結(jié)晶紫液，染1min。

6、 水洗：用水緩慢沖洗涂片上的染色液，用吸水紙吸干。簡(jiǎn)單染色結(jié)束可觀察細(xì)胞形態(tài)。

7、 媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。

8、 脫色：吸去殘留水，連續(xù)滴加95%乙醇脫色20-30s至流出液無(wú)紫色，立即水洗。

9、 復(fù)染：滴加蕃紅復(fù)染1min，水洗。至此，革蘭氏染色結(jié)束。